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BodBoge | 如何解決單細胞測序前的細胞質控?

更新時間:2023-04-04瀏(liu)覽(lan):660次

單(dan)細胞(bao)測序(xu)(single cell sequencing)是指先分離(li)純化單(dan)個細胞(bao),并提取(qu)該細胞(bao)的DNA或RNA進(jin)行擴增后測序(xu)的技(ji)(ji)術。該技(ji)(ji)術廣泛應用于腫瘤、微生(sheng)物(wu)學、神經科(ke)(ke)學等重要生(sheng)命科(ke)(ke)學領域(yu),單(dan)細胞(bao)測序(xu)技(ji)(ji)術也(ye)逐漸成為了生(sheng)命科(ke)(ke)學研究的熱點。相比于宏觀組(zu)織(zhi)樣品的測序(xu),單(dan)細胞(bao)測序(xu)對于細胞(bao)和組(zu)織(zhi)的異質性具有更(geng)(geng)加明(ming)確的分辯,當(dang)然(ran),難(nan)度(du)也(ye)相對更(geng)(geng)高。

單細(xi)胞測序(xu)結合生命科(ke)學研究領域(yu)的(de)應用,已逐步向著(zhu)更(geng)高(gao)的(de)分辯能力(li)、靈敏(min)度、和更(geng)多的(de)維度邁進。


什么是單細胞測序?

單(dan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)測(ce)序(xu)是基于高通量測(ce)序(xu)(NGS)方法,可檢測(ce)單(dan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)基因(yin)組、單(dan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)轉錄組、單(dan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)表觀基因(yin)組,提供細(xi)(xi)(xi)胞(bao)間差異的高分(fen)辨率(lv)視圖,從分(fen)子水(shui)平揭示細(xi)(xi)(xi)胞(bao)奧秘。


樣本要求

01、 樣本總(zong)量

制備成單(dan)細(xi)胞(bao)懸浮液,一個樣本的細(xi)胞(bao)起(qi)始(shi)量需大(da)于(yu)1x105個(ge)


02、 樣品(pin)濃度(du)

最終上樣前細胞(bao)濃度在700-1200 cells/μL


03、 細胞活性

活細胞比率85%以上


04、  細胞大小

直(zhi)徑小于40μm


其它(ta)要求

1-細胞培養基(ji)及緩沖液(ye)不能含(han)有Ca2+Mg2+等影響酶活性(xing)的物質(zhi)。

2-組織需(xu)解離(li)成單(dan)細胞懸液,植(zhi)物細胞需(xu)制(zhi)成原(yuan)生質體(ti)。



為(wei)解(jie)決(jue)細胞計(ji)數準確性以及人工復核難的問(wen)題,博大博聚(ju)特推出(chu)一款全自動熒光細(xi)胞分(fen)析儀(JSY-FL-047"。儀器參照血球計數板計數規則,可實現人工比對儀器的計數結果。具有單細胞計數模式。為實驗用戶提供更可靠更高效的實驗解決方案。


全自(zi)動(dong)熒光細胞分析儀(yi)(JSY-FL-047)

1- 單細胞計數(shu)功能

儀(yi)器可(ke)識別出樣(yang)本(ben)中單個(ge)細胞所(suo)占比例聚團細胞所占比例(li),適合單細(xi)胞測(ce)序前對單個細(xi)胞的質控(kong)。


計數結果包含:總細胞數量、總細胞濃度、團聚活(huo)細胞團數(shu)(濃度(du)-比率)單個活細胞(bao)數量(liang)(濃度-比率)、總死(si)細胞數量(濃度-比率)

 

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