細(xi)胞(bao)計數是細(xi)胞(bao)培(pei)養過程(cheng)中的重(zhong)要步驟,為了(le)解細(xi)胞(bao)的濃度、數量和活率等信息,實驗人員常用臺盼藍染料或AOPI熒光染料對細(xi)胞(bao)進行染色-計數。
1、臺盼藍染色法(fa)
臺盼藍染(ran)色是細(xi)胞計數(shu)中常用的(de)活/死細(xi)胞鑒(jian)定染(ran)色方法之(zhi)一。
原理(li):正常的(de)活細(xi)胞,胞膜結構完(wan)整,能夠排斥(chi)臺(tai)盼藍,細(xi)胞不被染(ran)色(se);而死細(xi)胞的(de)胞膜不完(wan)整,通透(tou)性增(zeng)加,既死細胞會被染成(cheng)藍色(se),利用臺盼藍染料的特性便可區分活/死細胞。
缺點:
1-臺盼藍對(dui)細(xi)胞(bao)有毒害(hai)作用,會致死有損傷的(de)細(xi)胞(bao),導致細(xi)胞(bao)活性檢測(ce)結果有所(suo)偏差;
2-細(xi)胞(bao)碎片多、雜(za)質多等情況下(xia),無法進行(xing)準確計(ji)數(shu)。
適用細胞種類:培養(yang)系細胞。
2、AOPI染色法
當細胞樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)雜質過多,明場下無法(fa)進行準確計(ji)數時,我(wo)們可以在熒光(guang)通道下,用AOPI熒光(guang)染料對細胞進行染色。
原理:AOPI熒光染料因其只與DNA和RNA結合的特性——既活細胞呈現(xian)綠色(se),死細胞呈現(xian)紅色(se),利用AOPI染色法,可排除雜質對目標細胞的干擾,快速區分活/死細胞。
優點(dian):可排除紅細(xi)(xi)胞(bao)、血(xue)小(xiao)板(ban)、細(xi)(xi)胞(bao)碎(sui)片等(deng)雜(za)質(zhi)對目標細(xi)(xi)胞(bao)的(de)干擾。
缺點(dian):與(yu)臺盼藍(lan)試劑相比,成本較高。
適用(yong)細胞種類:免疫細胞、原代(dai)細胞、血液細胞等。
掃一(yi)掃 微(wei)信咨(zi)詢(xun)
©2024 廣州博大博聚科技有限公司 版權所有 備案號: 技術支持: Sitemap.xml 總訪問量:67152